小編告訴你超濾離心管使用需注意這些
更新時(shí)間：2021-03-04 點(diǎn)擊次數(shù)：1064次
超濾離心管的膜材質(zhì)是聚醚砜膜，截留分子量明確而準(zhǔn)，物化性能穩(wěn)定，蛋白吸附極低，產(chǎn)品回收率高?？梢詫?duì)病毒進(jìn)行多倍甚至高倍濃縮，有專門(mén)針對(duì)病毒的膜，不同的病毒需要選擇合適的膜孔徑。超濾離心管在使用前應(yīng)用純化水進(jìn)行初離心，以驗(yàn)證其完整性，每次使用完成后，要求濕態(tài)保存，防止膜干燥。
超濾離心管使用注意：
1、選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。
2、新買(mǎi)來(lái)的超濾是干燥的，使用前加入超純水，水量*過(guò)膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過(guò)管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預(yù)冷。
3、直接損壞超濾膜。要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開(kāi)離心機(jī)，否則離心機(jī)出問(wèn)題時(shí)，無(wú)法一時(shí)間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說(shuō)明書(shū)調(diào)整。在實(shí)際使用中，一般轉(zhuǎn)速開(kāi)的比說(shuō)明書(shū)里的要低，這樣可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。
4、當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí)，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒(méi)變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開(kāi)始超濾。要精確判斷是否漏管。離心過(guò)程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過(guò)高還是Buffer不合適。
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